Hematoxilina | ||
Identificação | ||
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N o CAS | ||
N o ECHA | 100.007.490 | |
N o RTECS | MH7875000 | |
PubChem | 10603 | |
SORRISOS |
C1C2 = CC (= C (C = C2C3C1 (COC4 = C3C = CC (= C4O) O) O) O) O , |
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InChI |
InChI: InChI = 1S / C16H14O6 / c17-10-2-1-8-13-9-4-12 (19) 11 (18) 3-7 (9) 5-16 (13,21) 6- 22-15 (8) 14 (10) 20 / h1-4,13,17-21H, 5-6H2 InChIKey: WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N |
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Aparência | sólido cristalino inodoro, incolor (amostras puras) ou bege a marrom escuro, dependendo das impurezas | |
Propriedades quimicas | ||
Fórmula bruta |
C 16 H 14 O 6 [Isômeros] |
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Massa molar | 302,2788 ± 0,0156 g / mol C 63,57%, H 4,67%, O 31,76%, |
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Propriedades físicas | ||
Fusão T ° | 200 ° C | |
Precauções | ||
SGH | ||
Aviso H302, H315, H319, H335, P261, P305 + P351 + P338, H302 : Nocivo por ingestão H315 : Provoca irritação cutânea H319 : Provoca irritação ocular grave H335 : Pode irritar as vias respiratórias P261 : Evite respirar as poeiras / fumos / gases / névoas / vapores / aerossóis. P305 + P351 + P338 : Se entrar em contato com os olhos: enxágue cuidadosamente com água por vários minutos. Remova as lentes de contato se a vítima as usar e elas podem ser facilmente removidas. Continue a enxaguar. |
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Ecotoxicologia | ||
LogP | 0,710 | |
Unidades de SI e STP, salvo indicação em contrário. | ||
A hematoxilina , madeira preta ou Black natural 1 ( CI 75290) é um composto orgânico com a fórmula C 16 H 14 O 6. É uma tintura preta, extraída do cerne do campeche ( Haematoxylum campechianum ). É utilizado principalmente em histologia , como tinta e como corante na indústria têxtil e do couro. Na histologia, a coloração com hematoxilina é frequentemente seguida pela eosina (contracoloração), processo esse chamado de " coloração HE ", uma das combinações de corantes mais amplamente utilizadas na área. A hematoxilina também é um dos componentes da coloração Papanicolaou (coloração PAP) amplamente utilizada em citologia .
Embora o corante seja comumente referido como "hematoxilina", o corante ativo é na verdade sua forma oxidada, hemateína , que forma complexos altamente coloridos com certos íons metálicos (especialmente sais de Fe (III) e Al (III).)). Em sua forma pura, a hematoxilina é um sólido cristalino incolor, mas as amostras comerciais geralmente apresentam uma coloração marrom-escura devido às impurezas.
Lascas de madeira de cerne ( Haematoxylum campechianum )
Pó de hematoxilina
Embora a hematoxilina tenha sido sintetizada, ela nunca foi sintetizada em quantidades comerciais, e toda a hematoxilina comercialmente disponível é extraída da madeira. Historicamente, a madeira - originária do México - era exportada para a Europa de onde era extraída a hematoxilina, mas hoje essa extração é feita mais perto do local de produção. Existem dois processos de extração da hematoxilina em escala industrial: o “processo francês”, onde as aparas de madeira são fervidas em água, e o “processo americano”, onde a madeira é submetida à pressão de vapor d'água. Uma vez extraído, o corante pode ser vendido como um líquido concentrado ou seco e vendido na forma cristalina. Os métodos de produção modernos usam água, éter ou etanol como solvente , os extratos podem ser posteriormente refinados até o nível de pureza desejado.
As amostras comerciais podem variar dependendo do lote ou do local de produção, tanto no nível de impurezas quanto na relação hematoxilina / hematina (forma oxidada da hematoxilina). Isso é particularmente um problema em histologia, pois essas variações podem afetar a coloração e distorcer as observações, motivo de preocupação para histologistas e patologistas . Como com outros corantes, certos lotes de hematoxilina podem ser certificados pela Biological Stain Commission (in) , o que significa que o lote específico passou em um teste padronizado, mas não disse nada sobre sua pureza.
A hematoxilina pode ser usada isoladamente como coloração histológica . É usado principalmente para colorir o núcleo das células , mas também tinge o retículo endoplasmático rugoso , ribossomos , colágeno , mielina , fibras elásticas e mucinas ácidas. A hematoxilina sozinha não é um corante eficaz, mas oxidada a hemateina e combinada com um mordente (en) , pode manchar a cromatina de um núcleo de uma cor que varia do azul escuro ao preto. A cor e a especificidade da coloração com hematoxilina dependem de sua natureza química, sua quantidade, o mordente usado e o pH da solução de coloração; assim, várias formulações à base de hematoxilina foram desenvolvidas.
A hematoxilina também está frequentemente associada a um ou mais corantes. Uma das associações mais amplamente utilizadas em histologia é aquela com a eosina , conhecida como coloração HE . A hematoxilina também é, junto com a eosina e a laranja G , um componente da coloração de Papanicolaou (coloração PAP) amplamente utilizada em citologia , em particular para o teste PAP para rastreamento do câncer cervical . Pode-se também citar os HPS coloração (en) (hematoxilina / Floxina / açafrão ), os HES coloração (hematoxilina / eosina / açafrão), a mancha de van Gieson (en) (hematoxilina / fucsina ácida / ácido pícrico ), o Goldner coloração ( hematoxilina / fucsina ácida / RAL 6027), coloração de Ladewig (laranja G / azul de metileno / fucsina ácida / hematoxilina) e coloração PAS (hematoxilina / ácido periódico / reagente de Schiff )
Formulações de corantesAs formulações de corantes de hematoxilina podem ser classificadas de acordo com o método de oxidação da hematoxilina e a escolha do mordente. A hematoxilina pode ser oxidada naturalmente, por exposição ao ar e à luz, ou mais comumente por soluções oxidantes, por exemplo, por iodato de sódio . Normalmente, é adicionado oxidante suficiente para converter apenas metade da hematoxilina em hemateina, deixando o resto oxidar naturalmente ao longo do tempo. Esta é uma forma de prolongar a vida útil da preparação, porque a hemateína assim produzida tardiamente substitui pelo menos parte da hemateína que também se oxida naturalmente com o tempo em oxiemateina. Dentre os sais metálicos usados como mordentes, aqueles com alumínio são os mais comuns; sais de ferro , tungstênio , molibdênio ou chumbo também são usados .
Dependendo da formulação, o corante pode ser utilizado de duas formas: de forma "gradual" onde a quantidade de corante utilizada é controlada pelo tempo de contato entre o tecido e a solução, ou de forma "regressiva", onde a a amostra fica super colorida e o excesso de corante é então removido em uma segunda etapa. Para remover esse excesso de corante (etapa às vezes chamada de "diferenciação"), geralmente é usada uma solução diluída de etanol e ácido clorídrico .
Sobrenome | Referência | Mordendo | Método de oxidação | usar |
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De Ehrlich hematoxylina | Ehrlich, 1886 | alúmen de potássio | natural | Coloração de núcleo H&E |
De Delafield hematoxilina | Prudden, 1855 | alum de amônio | natural | Coloração de núcleo H&E |
Mayer hematoxilina | Mayer, 1903 | alúmen de potássio ou amônio | iodato de sódio | Coloração de núcleo H&E |
Hematoxilina de Harris | Harris, 1900 | alúmen de potássio | óxido mercúrico | Coloração de kernel H&E , também usada em versões clássicas da coloração de Papanicolaou |
Hematoxilina de Cole | Cole, 1943 | alúmen de potássio | iodo | Coloração de núcleo H&E |
Carazzi hematoxilina | Carazzi, 1911 | alúmen de potássio | iodato de potássio | Coloração do núcleo de H&E , serviços de biópsia urgentes |
De Weigert hematoxilina | Weigert, 1904 | cloreto férrico | natural | Mancha de núcleo H&E , resistente a ácido |
Verhoeff hematoxylin | Verhoeff, 1908 | cloreto férrico | iodo | fibras elásticas , mielina |
Hematoxilina (en) de ácido fosfotúngstico de Mallory | Mallory, 1897 | ácido fosfotúngstico | natural ou químico | fibrina , músculo estriado |
Hematoxilina de Gill (I, II e III) | Culling et al. 1985 | sulfato de alumínio | iodato de sódio | Coloração de núcleo H&E |
Em 1758, Georg Christian Reichel usou hemotoxilina, sem mordente, para colorir tecidos vegetais. John Thomas Quekett , em um livro de 1852, sugere o uso de "campeche" (hematoxilina) para tingir materiais translúcidos para exame ao microscópio . Em 1863, Wilhelm von Waldeyer-Hartz usou hematoxilina em tecido animal, sem morder (com sucesso limitado) e às vezes é creditado como o pioneiro no assunto, fato que, entretanto, não é universalmente aceito. Franz Böhmer em 1865 publicou uma formulação de hematoxilina usando alúmen como mordente, e em 1891 Paul Mayer publicou uma formulação usando um oxidante químico para converter hematoxilina em hemateína. O uso de hematoxilina com eosina como contracoloração foi sugerido pela primeira vez por A. Wissowzky em 1876. No início dos anos 1900, a hematoxilina havia se tornado uma coloração comum na histologia.
Escassez e alternativasDurante as duas guerras mundiais, final da década de 1920, início da década de 1970 (verão de 1973) e em 2008, o mundo experimentou escassez de hematoxilina devido à interrupção de sua extração de madeira. Essas carências motivaram a busca por alternativas quanto ao seu uso como corante central. Vários corantes sintéticos foram propostos como alternativas, incluindo azul celestial (CI 51050 ), galocianina (CI 51030), galleína (CI 45445) e eriocromocianina R (CI 43820) (também referido como cromoxano cianina R e solocromo cianina). Todos os quatro usam Fe (III) como uma mordida . Outra solução é o complexo de alumínio brasil oxidado, que difere da hematoxilina apenas por um grupo hidroxila a menos. Um dos maiores obstáculos para o desenvolvimento desses substitutos vem da relutância dos histologistas e patologistas em abandonar a coloração HE , uma ferramenta confiável que passaram anos estudando, manipulando e usando para fazer diagnósticos médicos. Um dos imperativos para o desenvolvimento de tais substitutos, portanto, passa a ser não perturbar esse funcionamento. Até o momento, nenhuma das alternativas propostas foi amplamente adotada.
A hematoxilina foi usada pela primeira vez como uma tintura pelos maias e astecas na América Central , de onde a madeira se originou. Foi introduzido pela primeira vez na Europa pelos espanhóis e rapidamente adotado. A hematoxilina foi usada para tingir vários tecidos de preto, azul ou roxo e permaneceu como um corante industrial importante antes do desenvolvimento de alternativas sintéticas. Usado como um corante azul (com alume como mordente), os resultados não foram inicialmente tão fortes quanto com índigo . Em resposta a esta percebida hematoxilina corantes de inferioridade, a sua utilização como corantes têxteis foi proibido na Inglaterra a partir de 1581 a 1662. Após a introdução de corantes negros sintéticos no final do XIX ° século , foi gradualmente substituída, comece por algodão têxteis . É em particular o preto da anilina que o tornará o maior competidor. A hematoxilina permaneceu um corante preto importante (com sulfato de ferro (II) ou cromo como mordente) para lã , até a década de 1920, quando os corantes sintéticos compatíveis se tornaram disponíveis (negro de diamante PV e negro de solocromo PVS). Hoje, a hematoxilina ainda é usada para tingir seda , couro e suturas .
A hematoxilina tem sido usada como o principal componente de algumas tintas , mas a época do primeiro uso é incerta. A hematoxilina também foi adicionada às tintas metalo-gal , que demoram algum tempo para escurecer quando aplicadas no papel. Nesse caso, a hematoxilina produz o aspecto inicial preto, antes que a tinta adquira sua cor final. William Lewis é creditado com o primeiro uso de hematoxilina como aditivo a uma tinta metalogálica em 1763. Em 1848, Friedlieb Ferdinand Runge produziu uma tinta hematoxilina não ácida, usando cromato de potássio como mordente, que tinha a vantagem de não corroer as pontas de aço. Sabemos que Van Gogh usou hematoxilina de tinta com cromo cromo cortante em muitos de seus desenhos e cartas.