A coloração do tecido biológico é freqüentemente necessária para a identificação. Algumas manchas são compatíveis com a vida celular, outras requerem fixação de tecido e, às vezes, a criação de cortes histológicos .
Para permitir a observação de organelas por microscopia de luz , são utilizadas substâncias corantes .
Um corante é uma solução aquosa que pode ser eletricamente carregada e que pode colorir uma substância ou um conjunto de substâncias de forma estável.
Consiste em um grupo cromóforo (cor) e um grupo auxocromo (grupo ionizado): fixação permanente em grupos ácidos ou básicos de constituintes celulares (em um determinado pH)
Características :
As substâncias ácidas (carregadas -) na célula são coradas com um corante básico (carregado +), as substâncias básicas (carregadas +) na célula com um corante ácido (carregado -).
Esta coloração dá cor a um tipo de enchimento. Podemos ver a morfologia da célula (forma), a posição do núcleo e sua forma. Assim, podemos determinar o número de tipos de células no tecido e a estrutura desse tecido (células ligadas ou não).
As reações redox que atuam nas macromoléculas fornecem informações sobre a constituição química da célula. Exemplos:
Os corantes ácidos possuem boa afinidade com substâncias alcalinas, destacam tecidos básicos e, portanto, acidofílicos .
Eles revelam tecidos ácidos, chamados de basofílicos .
Muitos corantes usam dois corantes: verde carmim ou iodo verde carmim (técnica de dupla coloração em rosa e verde), eosina - azul de metileno …
Alguns tecidos fixam prata. Falamos de estruturas argentafins ou estruturas argirofílicas .
Isso destaca os tecidos cromafins , como a medula adrenal.
Vários métodos de coloração foram desenvolvidos para revelar certas estruturas. Aqui estão alguns listados em uma tabela:
Coloração | Componentes | Citoplasma | Colágeno | Elastina | DNA | Outro | pH |
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Hematoxilina e eosina | Hematoxilina e eosina | vermelho / rosa | vermelho / rosa | vermelho | azul escuro | ? | |
van Gieson | Hematoxilina , Ácido Fucsina e Ácido Pícrico | amarelo | vermelho | - (às vezes rosa) | Preto | ? | |
Goldner | Hematoxilina , fucsina ácida , Verde Claro SF | vermelho | verde | - | Preto | ? | |
Elastica | Resorcinol , fucsina | marrom-púrpura | |||||
Azan | Azocarmina , azul de anilina | vermelho | azul | - (às vezes rosa) | vermelho | ||
Ladewig | Laranja G , azul de metileno , fucsina ácida , hematoxilina | vermelho ( eritrócito laranja) | azul | Preto | |||
Sudan III | Corante lipossolúvel | Gordura em laranja | |||||
NÃO | Hematoxilina , ácido periódico , reagente de Schiff | azul | Polissacarídeos : vermelho-púrpura | ||||
Nissl | Tionina (ou toluidina ou violeta cresil ) | azul (com RE ) | azul | ||||
Coloração May-Grünwald Giemsa | Eosina , azul de metileno e azul de metileno | vermelho nas hemácias , azul nos linfócitos | azul |
Embora não sejam manchas histológicas diretamente, esses métodos visam distinguir entre vários tipos de células. Eles também usam os mesmos tipos de corantes:
Para permitir a observação de organelas por microscopia eletrônica , são utilizados metais pesados como chumbo , urânio ou tungstênio . As regiões a serem coloridas tornam-se escuras porque poucos elétrons conseguem passar por esses metais.