O meio Löwenstein Jensen (LJ) é um meio de cultura semi-definido sólido fracamente seletivo utilizado em microbiologia para a cultura de Micobactérias , incluindo patógenos "complexo Mycobacterium tuberculosis ". Foi desenvolvido em 1932 por KA Jensen com base em uma fórmula proposta no ano anterior por E. Loewenstein. Devido ao custo-benefício satisfatório e à preparação relativamente fácil a partir de ingredientes comuns, ele se estabeleceu gradualmente como o meio sólido padrão para o diagnóstico microbiológico da tuberculose . Em 1998 foi o primeiro meio recomendado pela OMS para o isolamento de Micobactérias de amostras respiratórias.
Como outros meios à base de ovo, o meio LJ é cada vez mais desafiado pelo desempenho superior dos meios líquidos e dos sistemas automatizados de detecção de crescimento, cujas contribuições diagnósticas são significativas em termos de sensibilidade e, especialmente, velocidade. No entanto, a divulgação destas técnicas em desenvolvimento países , onde a tuberculose áreas endémicas são concentradas, é limitada pelo seu custo e por um aumento do risco de contaminação de culturas (meio selectivo menos) e pessoal de laboratório (produção de aerossóis durante o manuseamento).
A base nutricional é rica. Tal como o meio Ogawa , é um meio de ovo, sendo as importantes necessidades nutricionais das micobactérias cobertas pelas substâncias (lípidos, proteínas, vitaminas, etc.) contidas na clara e na gema de um ovo de galinha. A L-asparagina é uma fonte de nitrogênio do aminoácido. O glicerol completa essas contribuições, exceto para certas micobactérias (incluindo M. bovis ) sobre as quais exerce um efeito inibitório. O citrato e o magnésio são fatores de crescimento.
O amido incorporado inicialmente na forma de amido de batata é às vezes omitido porque seu papel nutricional não foi demonstrado.
O verde malaquita é um corante de estrutura triarilmetano utilizado como inibidor bacteriano de amplo espectro. O di-hidrogenofosfato de potássio é usado como tampão .
Para 1600 mL de meio (fórmula original contendo amido):
Alguns fornecedores oferecem a versão sem amido.
Os ingredientes termoestáveis são dissolvidos a quente em água destilada e a mistura é esterilizada em autoclave (15 minutos a 121 ° C). Os ovos são desinfetados com muito cuidado na superfície e, em seguida, trabalhando em condições assépticas, abertos e homogeneizados. O volume necessário de gema de ovo e emulsão de clara de ovo é medido usando um tubo de ensaio estéril e depois misturado com a solução anterior. O verde malaquita é introduzido assepticamente, por exemplo, por filtração esterilizante. A mistura é homogeneizada suavemente para evitar a introdução de bolhas de ar.
O meio é distribuído em recipientes esterilizados (tubos ou frascos) com tampas de rosca que são inclinadas de modo a formar uma rampa que se estende por toda a altura do recipiente. Eles podem coagular nesta posição por 45 minutos a 85 ° C. Para detectar qualquer contaminação durante a preparação, recomenda-se realizar um controle de qualidade sistemático, incubando o meio a 37 ° C por 24 horas. Após esta verificação, são conservados no frigorífico (2 - 6 ° C) com a tampa fechada por um período máximo de algumas semanas.
Várias variantes do meio LJ foram desenvolvidas para aumentar sua seletividade ou melhorar o crescimento de certas micobactérias: