Lck (para proteína tirosina quinase específica de linfócitos ) é uma proteína citoplasmática de 56 kDa que é expressa por células especializadas do sistema imunológico , denominadas linfócitos . Lck é uma tirosina quinase que fosforila as tirosinas de certas proteínas intracelulares, em particular ao nível das vias regulatórias para a ativação dos linfócitos. Esta proteína é um membro da família Src tirosina quinase .
Lck é mais frequentemente expressa por linfócitos T . Associa-se às caudas citoplasmáticas dos co-receptores CD4 ( linfócitos T auxiliares ) e CD8 ( linfócitos T citotóxicos ) como parte da ativação por meio do complexo receptor de células T (TCR). Quando uma célula apresentadora de antígeno apresenta , em seu MHC , um antígeno específico para um linfócito T naive, isso pode levar ao engajamento de TCRs. Quando o TCR é ativado, as ativações sucessivas que ocorrem são descritas como uma “cascata de sinalização”. No início da cascata, os co-receptores CD4 ou CD8 são aproximados do TCR. Essas proteínas estão associadas à tirosina quinase Lck que se torna ativa e fosforila os ITAMs localizados na cauda intracitoplasmática do CD3 . Esta etapa permite o recrutamento na cadeia zeta do TCR e a fosforilação, novamente por Lck, de outra tirosina quinase - ZAP70 - (“ proteína quinase associada à cadeia Zeta 70 ”). Zap70, por sua vez, fosforila as proteínas adaptadoras LAT ("L tinteiro para Ativação de Células T ", uma proteína transmembrana ) e LCP2 (" proteína citosólica de linfócitos 2 ", anteriormente SLP76).
Em torno dessas duas últimas proteínas, forma-se um complexo no qual outras proteínas se encontram e se ativam: por exemplo, PLC - γ (fosfolipase C gama). O PLC-γ, ao hidrolisar a membrana PIP 2, produz dois efeitos: o primeiro é o aumento da concentração intracelular de cálcio (denominado “pico de cálcio”) por intermédio do IP3 ( trifosfato de inositol ). O segundo efeito é a produção de DAG ( Diacilglicerol ) que permite a ativação de PKC , o que leva à ativação e translocação nuclear do fator de transcrição NF - қB . PKC permite a ativação da via da MAP quinase (levando à transcrição de AP-1 ). A ação conjunta das moléculas citadas acima induz a transcrição de genes envolvidos na proliferação e diferenciação de linfócitos T, por exemplo, IL-2, que é um fator de crescimento muito importante para essas células.
A função de Lck foi estudada usando vários métodos bioquímicos, incluindo gene knockout (knockout camundongos), células Jurkat deficientes em Lck (JCaM1.6) e técnica de interferência de DNA usando siRNAs .
Lck é uma proteína de 56 quilodaltons . A parte N-terminal da cauda do Lck é miristoilada e palmitoilada e está ligada à membrana plasmática da célula. Esta proteína também contém um domínio SH3, um domínio SH2 na parte C-terminal ao nível de seu domínio catalítico de tirosina quinase . Tem dois sítios principais de fosforilação: tirosina 394 e 505. O primeiro é uma fosforilação no próprio sítio e está ligada à ativação da proteína. O segundo é fosforilado por Csk , que causa inibição de Lck devido a uma mudança conformacional causando dobramento do domínio SH2. Assim, Lck é, portanto, um bom exemplo do fato de que a fosforilação pode resultar na ativação ou na inibição de uma proteína.
Esta proteína fosforila várias proteínas, as mais importantes das quais são o receptor CD3 , CEACAM1, ZAP-70, SLP-76, receptor IL-2, proteína quinase C, ITK, PLC , SHC, RasGAP, Cbl, Vav1 e PI3K .
Das células T em repouso, Lck é inibida constitutivamente por Csk e fosforilação de sua tirosina 505. Também é inibida pela proteína SHP-1 que desfosforila sua tirosina 394. Lck também pode ser inibida por Cbl ubiquitina ligase, que faz parte da via da ubiquitina .